熒光分光光度計狹縫步長的設置
狹縫的設置:
熒光強度跟很多因素有關,如分子結構、存在狀態、溶液濃度或薄膜厚度、溫度、選擇的激發波長、測試狹縫寬度等因素。熒光強度在不同儀器上的測量值存在大差異,不具有可比性,但是其峰位還是較容易確定的,可以用來判斷何種物質。進行熒光定量分析,必須固定一些條件。
狹縫的大小對熒光強度很重要,狹縫大小可根據你所測物質的熒光強度大小作適當的調整。在同一濃度,如熒光強度過大,超過儀器量程,可減小狹縫。但是,需要指出的是,不能僅憑狹縫的大小來改變熒光強度,還要考慮分辨率的問題。對于熒光掃描而言,狹縫加大可以使熒光強度提高同時重現性得到提高,但是分辨率隨之降低。狹縫決定分辨率,儀器其它結構已經固定(光柵的刻線數、焦距<及綜合的線色散系數),狹縫大小就決定分辨率的高低。對于實際使用,狹縫大小需要和測定的峰的半峰寬相匹配,過大,峰就變形了。狹縫大小也決定了光通大小。按照經驗數值,狹縫開大1倍,光通量將增大4倍。
步長的設置:
測量的步長小,測量會慢些,好處是圖譜細膩些;步長大,測量速度快,譜圖就顯得粗糙些。步長設置最好小于需要測量最小半峰寬的1/5,因為步長會與分辨率相關的。原則上,步長應小于3倍的狹縫寬度。
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