人體試樣的準備及處理

人體試樣可以分為均勻樣品和非均勻樣品。均勻樣品包括血漿、血清、全血、唾液、膽汁、乳汁、淋巴液、腦脊液、汗液、尿液和性腺分泌液等體液。非均勻樣品包括腦、心、肺、胃、肝、脾、腎、腸、子宮、睪丸、肌肉、皮膚、脂肪、組織、糞便排泄物等。幾種常見人體試樣的處理方法舉例說明如下。
1)血液樣品
(1)血漿。將采集的血液置于含有抗凝劑的試管中，混合后以2500～3000 rpm離心分離5 min使血細胞分離出來，分取上清液即為血漿?？鼓齽┡R床常用EDTA、肝素、草酸鹽、枸櫞酸鹽、氟化鈉等。血漿為全血的一半量，血漿中藥物濃度既反映了藥物在靶器官的存在狀況，又較好地體現了藥物濃度和治療作用之間的關系。血漿是臨床疾病治療最常用的生物樣品。
(2)血清。采取的血樣在室溫下放置30～60 min，待凝結出血餅后，用玻璃棒或細竹棒輕輕地剝去血餅，以2000～3000 rpm離心分離5～10 min，分取上清液即為血清。血清只為全血的20%～30%。血漿及血清中的藥物濃度測定值通常是相同的。血清成分更接近組織液的化學成分，測定血清中的藥物含量比全血更能反映機體的具體狀況
(3)全血。將采集的血液置于含有抗凝劑的試管中，保持血漿和血細胞均相狀態，即為全血。全血不易保存，血細胞中含有影響測定的干擾物質，故很少采用全血測定藥物濃度。
采血時的保存注意事項：①血漿或血清樣品必須置于硬質玻璃試管中完全密塞后保存；②采血后及時分離出血漿或血清再儲存。若不預先分離，血凝后冰凍保存。冰凍有時引起細胞溶解將妨礙血漿或血清的分離，有時因溶血影響藥物濃度。
2)尿液樣品
尿液主要成分為約97%的水，其余為鹽類、尿素、尿酸、肌酐等，一般沒有蛋白質糖和血細胞。體內藥物清除主要是通過尿液排出，大部分藥物以原型從尿中排泄。尿液取樣方便，并對機體無損傷。

若收集24 h的尿液不能立即測定時，為防止尿液生長細菌，令尿液中化學成分發生變化，應加入防腐劑置于冰箱中保存。常用防腐劑為濃鹽酸、冰醋酸、甲苯、二甲苯、氯仿、麝香草酚。每種尿液防腐劑都有其用量和適用測定成分的規定。例如，利用甲苯等可以在尿液的表面形成薄膜，適用于尿肌酐、尿糖、蛋白質、丙酮等生化項目的測定；利用乙酸等改變尿液的酸堿性來抑制細菌生長，適用于24 h尿醛固酮的測定。
3)唾液樣品
唾液是由腮腺、頜下腺、舌下腺和口腔黏膜內許多分散存在的小腺體分泌液組成的混合液。唾液的相對密度為1.003～1.008，pH為6.2～7.6。如果唾液分泌量增加，則趨向堿性，接近血液pH。有些藥物在唾液中的濃度可以反映游離型藥物在血漿中的濃度。在刺激少的安靜狀態下，漱口后15 min采集唾液樣品，立即測量除去泡沫部分的體積，以3000 rpm離心分離10 min，取上清液直接測定或冷凍保存，解凍后，為避免誤差，應充分攪拌均勻后再測定。
4)組織樣品
(1)勻漿化法：在組織樣品中加入一定量的水或緩沖液，在刀片式勻漿機中勻漿獲得組織勻漿，使被測藥物溶解，取上清液萃取。
(2)沉淀蛋白法：在組織勻漿中加入蛋白沉淀劑，沉淀蛋白質后取上清液萃取。
(3)酶水解：在組織勻漿中加入適量的酶和緩沖液，水浴水解一定時間，待組織液化后，過濾或離心，取上清液萃取。常用酶為枯草菌溶素。
(4)酸水解或堿水解：在組織勻漿中加入適量的酸或堿，水浴水解一定時間，待組織液化后，過濾或離心，取上清液萃取。
5)頭發樣品
一般采集枕部發樣0.05 g，使用中性洗滌劑浸泡10 min，棄去洗滌劑，用去離子水漂洗3次，用丙酮浸泡并攪拌10 min，再用去離子水漂洗3次，干燥并保存于干燥器內。頭發樣品中待測物的提取方式包括甲醇提取、酸水解、堿水解、酶水解，其中酶水解方法較為常用。

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