紫外可見分光光度法測定苯酚含量
A. 實驗原理
紫外可見吸收光譜法是以溶液中物質分子對光的選擇性吸收為基礎而建立起來的方法。與所有光度分析法一樣,其進行定量分析的依據是朗伯—比爾定律。苯酚是一種劇毒物質,可以致癌,已經被列入有機污染物黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超標,就會產生很大的毒害作用。苯酚在酸堿介質中吸收波長不同。在酸性及中性介質中,λmax≈270 nm;而在堿性介質中,λmax≈288nm。
本實驗在中性條件下測試,因此苯酚在紫外光區的最吸收波長λmax≈270 nm。在270 nm處測定不同濃度苯酚標準溶液的吸光值,繪制標準曲線。然后在相同條件下測定待測物的吸光度值。根據標準曲線可得待測物中苯酚的含量。
B. 儀器、試劑
1.儀器
UV-2450紫外可見分光光度計;電子天平。
容量瓶(250 mL、1000 mL);吸量管(5mL、10 mL);石英吸收池(10 mm);比色管(25 mL)。
2.試劑
苯酚。
3.標準溶液的配制
苯酚標準儲備液(100μg·mL^-1):準確稱取0.1000 g苯酚溶于200 mL去離子水中,然后轉移至1000 mL容量瓶中,用去離子水稀釋至刻度,搖勻備用。
C. 實驗步驟
1.系列濃度標準溶液的配制
于5支25 mL 比色管中,用吸量管分別加入0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、5.00 mL、10.00 mL 100μg·mL^-1苯酚標準儲備液,用去離子水稀釋至刻度,搖勻待測。
2.樣品測定
(1)定性分析:確定定性分析參數條件,然后將有空白溶液的兩個比色皿分別放入參比光路和樣品光路,進行基線掃描,再將裝有苯酚溶液的比色皿放入樣品光路,進行定性掃描。將苯酚的波長掃描圖與己知相同條件下的波長掃描圖或已知的譜圖比較,對試樣進行定性分析。
(2)定量分析:確定定量分析參數條件,然后用空白溶液進行調零。儀器調零后開始進行定量測量,按照提示依次放入系列濃度標準矛液和待測溶液。測定后,查看標準曲線,確定待測溶液中苯酚的含量。
D. 注意事項
(1)正確使用吸量管和容量瓶,移液、定容需要規范操作。配制標準溶液時,為了減少誤差,取不同體積的同種溶液應用同一支移液管。
(2)苯酚有劇毒,避免接觸皮膚。
(3)注意儀器的正確使用和保養維護。
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