熒光光譜儀
熒光光譜儀一般由光源、單色器、樣品池、檢測系統、讀數裝置等部件組成。光源激發被測物,單色器分離出所需要的單色光,檢測系統把熒光信號轉換為電信號。從光源發出的光照射到盛有熒光物質的樣品池上,產生熒光。熒光向四面八方發射,為了消除透射光的干擾,通常在與激發光傳播方向成90°的方向上測量熒光。樣品池常為矩形,在矩形池中以90°的位置進行測量可使入射光及被測熒光物質垂直通過樣品池壁,從而減少池壁列熒光的反射。
1.光源
由于發射熒光強度與入射光強度成正比,所以光源的強度直接影響其測量的靈敏度;而光源的穩定性則直接影響測定的重復性。高壓氙弧燈是目前熒光分光光度計中應用最廣泛的一種光源。這種光源外套為石英,內充氙氣。在250~800 nm波長區域為連續光普,450 nm附近有幾條銳線。氙燈燈光很強,且在250~400 nm輻射線強度幾乎相等。燈在平時或工作時都處于高壓之下,因此安裝和操作時應注意防護。另外,氙燈燈光強,射線對眼睛有損害,因此工作者應避免直視光源。氙燈使用壽命約為2000 h。
2.單色器
多數熒光分光光度計采用光柵作為單色器。一般有兩個單色器,第一個是激發單色器,置于光源和樣品池之間,用來選擇激發波長;第二個是發射單色器,置于樣品池和測器之間,用來選擇熒光發射波長。第二單色器能夠濾去激發光所產生的反射光、溶劑的雜散光和溶液中期質的熒光,只讓被測組分的一定波長的熒光通過,然后到達光電倍增管被檢測,再輸入記錄儀顯示記錄。
3.樣品池
熒光分析用的樣品池必須用低熒光材料制成,通常用不吸收紫外光的石英材料制成,形狀通常為長、寬各為1 cm的柱形石英池。測定低溫熒光時一般在石英池外套上一個裝有液氮的透明的石英真空瓶,以降低溫度。
4.檢測器
由于熒光的強度較弱,因此要求檢測器有較高的靈敏度。光電倍增管是常規熒光分光光度計最常用的檢測器。。工作時,要使發射單色器和檢測器所確定的方向與激發單色器和光源所確定的方向垂直。
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